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  • 2025-02-14

    在ELISA實驗中,標準曲線的問題可能由多種因素引起。以下是一些常見問題及其可能的原因和解決方案:###一、標準曲線不佳1.**不同濃度下的光密度(OD)值不一致**-**原因**:可能由于標準品或樣品的稀釋不準確、移液誤差、洗滌不充分等。-**解決方案**:確保標準品和樣品的稀釋準確,使用校準過的移液器,并確保洗板機正常工作,酶標板各孔被充分洗滌卻不干燥。2.**標準曲線無梯度**-**原因**:樣品或標準品污染、錯誤的稀釋、偶聯(lián)抗體濃度過高、顯色時間過長或孵育條件不當?shù)取?..

  • 2025-02-06

    試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被金屬硫蛋白(MT)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹di洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的金屬硫蛋白(MT)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉...

  • 2025-01-17

    試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被傳染性貧血病毒(CIAV-Ag)抗原的包被微孔中,依次加入標本、HRP標記的檢測抗原,經(jīng)過溫育并徹di洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中滑液囊支原體抗體病毒(MS-Ab)的存在與否。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺...

  • 2024-12-30

    細胞復蘇和凍存是細胞培養(yǎng)中常見的操作,主要用于保存和恢復細胞系。以下是一些基本的步驟和注意事項:###細胞凍存(Cryopreservation)1.**細胞準備**:選擇生長狀態(tài)良好的細胞,通過胰蛋白酶或EDTA等消化細胞,使其成為單個細胞懸液。2.**細胞計數(shù)**:使用細胞計數(shù)器確定細胞密度。3.**加入凍存液**:將細胞懸液與凍存液按一定比例混合,常用的凍存液含有DMSO或丙三醇等作為保護劑。4.**分配細胞**:將細胞懸液分配到凍存管中,通常每管的細胞量是1-2mL。...

  • 2024-12-25

    選擇PCR試劑盒的靈敏度時,需要根據(jù)實驗目的和樣本特性來決定。以下是一些關于選擇PCR試劑盒靈敏度的建議:1.**實驗目的**:-如果實驗目的是進行病原體檢測,特別是在病原體濃度可能很低的情況下,應選擇高靈敏度的試劑盒。-如果實驗目的是基因表達分析,并且目標基因的表達水平較高,可以選擇中等靈敏度的試劑盒。2.**樣本類型**:-對于含有大量抑制物的復雜樣本,如血液、尿液等,可能需要更高靈敏度的試劑盒來確保檢測的準確性。-對于相對純凈的樣本,如細胞培養(yǎng)物或純化的DNA/RNA,...

  • 2024-12-19

    判斷ELISA試劑盒中的試劑是否變質,可以通過以下幾種方法進行:1.**外觀檢查**:-檢查試劑是否有顏色變化、沉淀物或異物。-觀察試劑瓶是否有裂縫、漏液或瓶蓋密封不良的情況。2.**保質期檢查**:-檢查試劑瓶上的標簽,確認是否在有效期內。過期的試劑可能已經(jīng)變質。3.**性能測試**:-使用標準品或質控品進行測試,比較結果是否與之前的結果一致。-如果標準曲線的形狀或吸光度值與之前有顯著差異,可能是試劑變質。4.**存儲條件檢查**:-確認試劑是否按照推薦的存儲條件(如溫度、...

  • 2024-12-09

    ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)試劑盒是一種常用于檢測特定抗原或抗體的實驗室工具。關于ELISA試劑盒產(chǎn)品有效成分含量的特點,以下是一些關鍵點:1.**高特異性**:ELISA試劑盒中的有效成分,如抗原或抗體,通常具有非常高的特異性,這意味著它們能非常精確地識別并結合目標分子,而不會與其他分子發(fā)生交叉反應。2.**標準化**:ELISA試劑盒中的有效成分含量是經(jīng)過嚴格標準化的。制造商通常會提供已知濃度的標準品,以確保檢測結果的準確性和重復性。3.**穩(wěn)定性**:有效成分通常在特...

  • 2024-12-06

    試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被氫化酶(HYS)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹di洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的氫化酶(HYS)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品活性。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心...

  • 2024-12-04

    ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實驗)是一種用于檢測和定量特定抗原或抗體的免疫分析技術。為了避免交叉污染,可以采取以下措施:1.**分區(qū)操作**:-將實驗分為加樣區(qū)、反應區(qū)、洗板區(qū)和讀板區(qū),各區(qū)域使用不同的器材,避免交叉使用。2.**使用一次性耗材**:-使用一次性的吸頭、手套和包被板,用后即棄,避免重復使用。3.**清洗和消毒**:-定期清潔實驗室工作臺面,使用70%乙醇或其他消毒劑進行消毒。-洗板機在使用前后都要進行清潔和消毒。4.**正確的操作技術**:-加樣時避免液體飛濺,不...

  • 2024-11-28

    Elisa試劑盒洗滌液的選擇對于實驗結果的準確性至關重要。以下是一些選擇洗滌液時應當考慮的因素:1.**離子強度**:洗滌液通常含有一定濃度的鹽,如氯化鈉或磷酸鹽,以維持適宜的離子強度,這有助于減少非特異性吸附。2.**pH值**:洗滌液的pH值應該與Elisa實驗中的其他步驟相匹配,通常接近中性或略偏堿性,以確保不影響抗體與固相載體的結合。3.**洗滌劑**:洗滌液中通常會加入洗滌劑,如吐溫20(TWEEN20)或吐溫80,以及非離子洗滌劑如TritonX-100。這些洗滌...

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